提到實驗室你會想起什么?是裝滿各種“神秘液體”的試管和錐形瓶?還是一臺臺“高大上”又神秘莫測的實驗儀器?提到科研人員你又會想起什么?是整齊化一的白大褂和橡膠手套?是一張張嚴肅認真卻略顯刻板的臉?而這些科研人員每日待在不過幾十平方米的實驗室里都在做些什么?本文作者就讀于中國科學(xué)院植物研究所,初進入實驗室、作為科研小白的她跟大家講述她在實驗室所經(jīng)歷的一天。
早晨7點30分的鬧鐘準時響起,將我從沉沉的夢中拽出,我掙扎著關(guān)上鬧鐘,心想再睡5分鐘。就在我即將再次沉入睡夢中時,腦海中突然浮現(xiàn)出“一抗”兩個字,我一個激靈坐了起來:8點半前必須加上一抗。我看了下手機7:38,心想:我得抓緊了。
沖進實驗室大門,分針指向8點25分??粗缫衙β灯饋淼腦師姐,一陣羞愧的熱浪瞬間沖散了我早上的起床氣。從冰箱吸出一抗加進盛放PVED膜的盒子里,開始計時,8點28分。我松了一口氣,隨即撕下一張便利貼,寫下“2:30pm洗膜&二抗”。
我快步去拿EP管,差點和手捧水稻苗的Y師姐撞在一起,師姐護著水稻苗卻濺了一身水,她卻不停地說,“對不起、對不起”,搞得我愧疚難當。師姐看透了我的心思,笑了笑:“沒事兒,快干活兒吧,丫頭!”我紅著臉投入到了Real-time PCR實驗中。
這時T師兄到我們屋的-30℃冰箱找連接酶,X師姐問道:“師兄,你的文章投的怎么樣了?”T師兄淡淡地回道:“被拒了。”正在做實驗的G師姐放下手中的移液槍,驚嘆道:“做了這么多實驗,這么多數(shù)據(jù),文章這么好怎么能就被拒了!”Y師姐邊取水稻葉片樣邊說:“怎么可能!我覺得投的那個雜志都太低了,質(zhì)量這么高的文章都能被拒!”T師兄將連接酶放到冰盒,回道:“那也不一定,如果正好碰上個專門做修飾組學(xué)的專家,那可能在他看來不夠深入?!闭f完他就去做實驗了。曉玉師姐說:“修飾組學(xué)動物中做的比較多,水稻中研究的很少,T師兄在水稻中能做到這個程度已經(jīng)很不錯了?!薄澳茄a實驗又得一年半載的,T師兄這博后又得延期一段時間了?!薄叭薚師兄才不在乎這些,他一心撲在科研上,在他心里只有把實驗做出來才是要緊的?!甭犃诉@些話我心里一陣唏噓,我加好的樣放到Real-time PCR儀里,緊接著就去提取水稻DNA。
光照培養(yǎng)間內(nèi)F師兄在拍冷處理過的水稻苗,W師姐舉著苗子在燈下觀察表型。我看著自己種下的水稻慢慢萌芽、出苗、長成一排排頂著尖尖綠腦袋的小苗,會有一種“老母親”的幸福感。我剪下一株株水稻幼苗葉片放到EP管里,我看了看時間,已經(jīng)過去20分鐘了,取樣用了太多時間,后面實驗要做不完了,不由得著急起來。我快速取好樣放到振蕩器上磨碎,磨碎需要3分鐘,這時間正好去做板瓊脂糖膠下午跑電泳用。
我從烘箱中取出充分反應(yīng)的葉片樣品到通風(fēng)櫥中加核酸提取液,即使是在通風(fēng)櫥中,提取液中氯仿刺鼻的氣味仍然嗆得我想趕緊加完,可忙中出錯,一管樣品灑了出來,看著只剩下半管的樣品,我心疼不已,爾后才發(fā)現(xiàn)核酸提取液已經(jīng)將手套腐蝕出一條長而猙獰的“燙傷”,不禁心驚后怕。
11點我端著樣品回實驗臺離心,此時,屋內(nèi)計時器鈴聲此起彼伏,大家急匆匆的在各個實驗室各個儀器前穿梭,一個實驗接一個實驗恨不得身上綁上10個計時器。我看了看時間,11點10分,Real-time PCR應(yīng)該完成了,我趕緊跑去將96孔板取出,大致看了看Real-time PCR曲線,還不錯,懸著的心終于放下一半:做了3次,這次終于可能要做出來了,不過具體結(jié)果還要等晚上分析完數(shù)據(jù)才知道,我拷完數(shù)據(jù)接著回去提取DNA。這時公司測序返得菌液和質(zhì)粒送到了,我挑選出昨天晚上DNA序列比對正確的準備搖菌提質(zhì)粒,在放滿錐形瓶、EP管的搖床找了個空位插了進去,撕下一張便利貼寫下“7:00pm小提質(zhì)粒”。
提取完DNA,終于有時間停下來喘口氣了,此時我才覺得嗓子干渴難耐,跑去休息室接水喝,休息室內(nèi)G師兄和T師兄猶如兩座大山巋然不動地盯著電腦改文章,喝完水一看已經(jīng)11點30分了,心想:糟糕要趕不上吃飯了。我快步跑回實驗室,開始用TBST洗加完一抗的膜,每隔10分鐘洗一次要洗三次,吃飯前勉強能趕得上加二抗。
12點多,大家都忙完吆喝著一起去吃飯。去往餐廳的路上,亭亭玉立的美人榆、婀娜多姿的碧玉、豪放的連翹、大家閨秀般的西府海棠……林立路旁,各自風(fēng)姿綽約。走在春天的植物所,總讓人不禁生出“不到園中,怎知春色如許?”的感慨,看著滿園春色,實驗的壓力和煩惱仿佛也彌散在這生機勃勃的春色中了。
越過這一路旖旎春光,我們便來到了餐廳,日常吐槽完飯菜的單調(diào)、沒味以及量少后,G師姐說:“昨天晚上我夢見我的水稻著火了,火光滿天我在旁邊嚎啕大哭,水稻沒了,我這是別想畢業(yè)了?!盭師姐說:“前幾天我也夢見我的小麥種子不萌發(fā),實驗一點也做不下去,我束手無策地看著小麥種子急的眼淚直掉?!盰師姐笑著說:“你們這都是被實驗逼瘋了吧!都瘋魔了,快別想了,趕緊吃飯吧!”記得不久前我還夢見自己做實驗加錯試劑被師姐批評,暗自心想:原來師姐們也會做這種噩夢。
回到實驗室后我趕緊加上二抗,記下“晚上洗膜&二抗”。隨即我繼續(xù)了昨天沒有成功的構(gòu)建實驗,昨天的實驗可能是哪里出錯了呢?各個樣品PCR擴增條帶很亮,濃度不會很低,是不是酶切的質(zhì)粒載體濃度太低?也只能嘗試重新酶切質(zhì)粒載體。
這時公司送來了昨天我設(shè)計好的引物,上午提的DNA下午要跑PCR擴增鑒定。等我做完P(guān)CR實驗,time上顯示載體還有十分鐘切好,我坐下來,思索著接下來要做的實驗。這時Z師姐來到我們屋,對X師姐說:“師姐,我連不上果然是因為接頭不行,昨天我換了你給我的接頭今天就連上了!” X師姐回道:“有時候接頭沒設(shè)計好或者選取的酶切位點不好就很難連上?!盭師兄在-30℃冰箱一陣翻找后對著Y師姐說:“KpnI沒有了!”Y師姐過去找也沒有找到對X師兄打趣道:“我這內(nèi)切酶斷貨,耽誤X老師畢業(yè)了。”X師兄輕笑著嘲諷說:“那畢業(yè)這種大事也不是你能耽誤的!”
time響了起來,我從烘箱取出切好的載體,到電泳槽前電泳。因為瓊脂糖凝膠所用染料具有一定潛在致癌性,所以我在橡膠手套外又戴上一次性手套,同時也要嚴格注意不能讓膠接觸到染料污染區(qū)外。電泳跑完后,我把膠拿到暗室紫外燈下,看到明亮的條帶后我小小開心了下,然后小心翼翼地切下條帶放到EP管,準備回收跑膠純化后的載體。我準備好膠回收的管純化回收,為了提高濃度,最后用水洗脫兩次我才去測濃度,濃度很高,這次肯定能構(gòu)建上了。
我看了一下時間,下午4點30分,PCR擴增應(yīng)該結(jié)束了,我取出擴增后的樣品跑電泳,然后記錄下有條帶的樣品。我回到實驗臺,師姐提醒剛才time響了,連接已經(jīng)完成了,我趕緊取了冰盒去-80℃取感受態(tài)細胞。我用盡全身力氣打開-80℃冰箱厚重的門,一股刺骨的寒氣襲來,我不禁打了個寒顫,容納-80℃感受態(tài)細胞的EP管放在手里總讓人聯(lián)想起液氮濺到身上的感覺,接下來我將連接好的質(zhì)粒熱激進入感受態(tài)細胞,然后加入培養(yǎng)液搖菌,搖菌大概需要半個小時,趁這時間我到光照培養(yǎng)間給冷處理過的水稻苗澆水。
培養(yǎng)間內(nèi)我冷處理過的水稻苗呈現(xiàn)出半干枯狀態(tài)和野生型堅挺形成鮮明對比,我內(nèi)心歡呼雀躍,想:再過兩天就可以拍照記錄了。我拿著搖好的菌液到超凈工作臺倒入培養(yǎng)基,正巧遇見D同學(xué)也在,她問我:“你這實驗昨天不是做過了嗎?”我嘆了口氣:“我就是條咸魚,實驗從來不會一次成功?!彼矅@了口氣:“誰不都一樣,實驗?zāi)哪芤淮尉统晒?#xff0c;我這互作做了一個月了不也是沒有做出來?!蔽覀儍扇祟D時生出咸魚惺惺相惜之感。但是不管失敗多少次,都得繼續(xù)做。
不知不覺已經(jīng)晚上6點多了,我叫上師姐們一起去餐廳吃飯。走在路上,抬頭便能看見太陽落在不遠處的香山上,暮靄沉沉,一派安靜祥和。
回到實驗室也已經(jīng)7點了,看到“晚上7點提質(zhì)粒”的便簽,我趕緊找來提質(zhì)粒的各種溶液,又從搖床取出早上搖的菌液,到離心機離心集菌,打開搖菌管,菌液散發(fā)出一種特殊的味道,剛進實驗室時覺得這個味道特別臭,現(xiàn)在聞得多了反倒能感受到一種菌液特有的“菌香”。我提完質(zhì)粒,測好濃度已經(jīng)是快8點了,想想“二抗”已經(jīng)孵育5個小時了,我趕緊用TBST洗膜發(fā)光,我?guī)е赐甑哪淼桨l(fā)光儀前發(fā)光,發(fā)光180秒并未看見明顯條帶,我干脆把模式調(diào)成了10分鐘。等待的過程不由得緊張起來,就像等待考試結(jié)果那樣惴惴不安,畢竟是做了近半個月的實驗,失敗了好幾次,嘗試不同的實驗方法和條件,可以說這張膜凝聚了我半個月的心血,當電腦屏幕上顯示出膜上一條較為清晰的條帶時,我禁不住欣喜若狂起來,站在旁邊的G師姐問道:“發(fā)出來了?看把你高興的?!蔽覜]有說話,抿著嘴笑起來算是默認了。我在實驗記錄本上寫下:用flag標簽?zāi)茈s出目的蛋白。
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